Kidney Int ：肾小管生物钟调节功能障碍导致糖尿病症状肾糖异生增强和加重高血糖

背景及目的：在心血管疾病病人中所，心脏通过降低原胃中所的重吸收和上调近端毛细血管中所的催化反应来促进心血管疾病心力衰竭的暴发。然而，食欲技术水平的慢性下降有可能反过来导致心血管疾病肾病(DN)，这是心血管疾病最严重的肝硬化之一，其特征是血栓、上皮细胞会和心脏血管受损。虽然新陈代谢应激是心血管疾病肾病暴发和的发展的主要考量，但在大多数心血管疾病病人中所，心力衰竭本身并不会导致肝功能不全。这断定，合并症或状况、基因型或微小基因型的变化有可能是触发和/或加速实质性DN所必需的。生理反应是一种密切相关的分子结构计时机制，它将细胞会、的组织和系统设计的生物功能与24天内的状况生命期同步。局部生理反应涡轮机细胞会类型和的组织特有的节律，它们的嗜睡与一系列疾病的确诊和/或实质性有关。然而，心血管疾病病人心脏中所内在生理反应的病变生理作用仍不清楚。

方法：为了解决这个问题，我们用链苯甲酸佐抗病毒可借了足细胞会(cKOp大鼠)或上皮细胞会(cKOt大鼠)中所缺乏昼夜节律酪氨酸平衡因子BMAL1的大鼠患I型心血管疾病。

大鼠模型分离出：8周龄Bmal1lox/lox/Nphs2-RTTA/LC1大鼠(cKOp大鼠)或8周龄Bmal1lox/lox/Pax8-RTTA/LC1大鼠(cKOt大鼠)经DOX(饮水中所2 mg/ml)妥善处理2亦同，Bmal1(ARNTL)基因失活。他们的样本(Bmal1lox/lox大鼠)接受完全相同的DOX用药。在DOX用药终结一亦同，通过小肠施用链苯甲酸佐抗病毒(STZ，50 mg/kg体型，每日5天)可借I型心血管疾病。溶媒妥善处理的大鼠接受PBS的溶媒施用。所有科学研究均在最后一次施用STZ或溶媒8亦同进行。在所有科学研究中所，从ZT9处死的大鼠身上采集的组织和体内(ZT-Zeitgeber星期单位；ZT0是进门星期，ZT12是关灯星期)。

新陈代谢腺体：大鼠被饲养在个体新陈代谢鸽子中所(Tecniplast，法国)。在4天的适应期后进行24天内的胃液收集。

白蛋白和胃液生化测定：用Vaudois中所心医院流行病学科学研究室(LCC)测定胃和白蛋白Na+、K+、Ca2+、Mg2+、磷酸盐、肌酐、、胃酸和硫浓度及渗透压。用氯化亚铜明为(Metrohm)测定胃液pH绝对值。采用EPOC体内分析明为(西门子公共卫生)测定动-静脉混合成血的体内pH绝对值和血气。胃铵测定引入Berthelot法。胃可氢氧化钠酸测定引入Chan25方法。引入放射免疫法(DPC)测定白蛋白醛固酮技术水平。用Mercodia公司的试剂盒测定白蛋白生长激素。

耐量飞行测试(GTT)：绝食15天内后，给空白样本和cKOt大鼠小肠施用(1g/kg体型)。分别于施用前(t=0)、施用后15、30、60、90、120、180min，用食欲温度计明为测定食欲。

生长激素耐量飞行测试(ITT)：绝食4h后，给样本和cKOt大鼠小肠施用0.5U/kg体型的重组人生长激素(人重组生长激素，Sigma)。分别于生长激素施用前(t=0)、生长激素施用后15、30、45、60、90、120、150、180min测定食欲。如果食欲升至2 mm都有，则通过小肠施用30毫克搭救大鼠，并将其排除在分析之外。

RNA测序技术：RNA-SEQ按照Ansermet等人在6.Mus Musculus中所的描述进行。采用GRCm38.92基因注释。采用TMM消去对基因可用进行定标，并采用LIMMA R包27中所的“CPM”函数将其比绝对值变换为每百万可用(CPM)。计算了KO和Ctrl类动物在未妥善处理(PBS)和妥善处理(STZ)条件下的区别表达以及二者之间的相互作用。对于这三种比较中所的每一种，选择FDR

结果：在患心血管疾病的cKOp和cKOt大鼠中所，生理反应外周与心血管疾病肾病的暴发没有差异性。然而，与链苯甲酸佐抗病毒用药的样本相比，患心血管疾病的cKOt大鼠展现出出加心力衰竭过多，胃中所排泄降低，多胃降低，心脏肥大愈来愈明显。mRNA和蛋白质表达分析辨识，与心血管疾病样本大鼠相比，cKOt心血管疾病大鼠心脏中所的催化反应除此以外突出增强。CKOt心血管疾病大鼠的酪氨酸分析和功能分析确定了直接或间接负面影响催化反应除此以外的多种机制的变化。

事实：我们证明了内在上皮细胞会生理反应外周可通过增强肾近端毛细血管的催化反应而过多心血管疾病心力衰竭，全面务实了生理反应平衡在心血管疾病病人中所的重要性。

原文引自：

Ansermet C， Centeno G， Bignon Y，et al.Dysfunction of the circadian clock in the kidney tubule leads to enhanced kidney gluconeogenesis and exacerbated hyperglycemia in diabetes.Kidney Int 2021 Nov 24